27.02.2025
Hochdurchsatz-Aufreinigung von Plasmid-DNA und in vitro transkribierter mRNA mit einer Hochgeschwindigkeitszentrifuge
Pascal Rowart, et al. , Eppendorf Application Technologies S.A.
In diesem Fachartikel wird gezeigt, wie die Centrifuge CR22N ebenfalls für die Aufreinigung von Plasmid-DNA und PCR-Produkten eingesetzt werden kann, was als ein erster Schritt innerhalb des Workflows der mRNA-Produktion zur in vitro-Transkription dient.
Zu diesem Zweck wurde eine großformatige Bakterienkultur geerntet, welche eine Plasmid-DNA enthielt und im Innova® S44i Schüttler kultiviert worden war. Der Rotor R9A2 wurde eingesetzt, um 3 L Bakterienkultur zu pelletieren.
Die DNA-Aufreinigung des gesamten Bakterienpellets aus einer 1,5 L-Flasche wurde mithilfe einer Kombination aus Rotor R15A und Rotor R22A4 durchgeführt. Am Ende wird gezeigt, dass die mRNA durch hochqualitative in vitro-Transkriptionsprozesse produziert werden kann.
Der gesamte Arbeitsablauf wurde nach dem Protokoll und den Empfehlungen der wissenschaftlichen Veröffentlichungen von Rossi et al. durchgeführt.
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