Thema: Isomere Steroide chromatographisch trennen
Autor(in): Dr. Christian Dauwe am 12.06.2010 um 13:36:12
Trennungen von isomeren Steroiden sind
a) durch spezielle hochbelegte RP-C18 Säulen generell gut durchführbar. (z. B. AppliChrom OTU TriKala C18).
Andere Möglichkeit besteht in der Verwendung
b) spezieller RP-Phenylsäulen (z. B. AppliChrom OTU Phenyl).
a) und b) werden in einem normalen MeOH oder ACN/Wasser Gradienten betrieben. pH meist nicht bedeutsam (So keine weiteren Atome als HCO(F) im Steroid vorkommen. Am besten beide Säulen im RP-Gradienten screenen.
Andere Variante:
c) NP-HPLC an speziell oberflächendeaktiviertem SiOH - z. B. AppliChrom OTU SiOH.
Ob a) b) oder c) richtet sich nach der Art des Steroidmischung und den relativen Mengen in der Mischung; die Anwendung von RP- oder NP-Separationen entscheidet sich nach Herkunft der Probe bzw. der Probenvorbereitung.
Säulenabmessung richtet sich nach vorhandenen Anlagen sowie Anforderungen an die Analyse bezüglich Auflösung und Probenmenge.
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